原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)，是細胞培養(yǎng)中很重要的，其質(zhì)量決定著傳代細胞的質(zhì)量，因此它的培養(yǎng)的質(zhì)量至關重要。
 

　　原代細胞是非常敏感的細胞，需要傳統(tǒng)培養(yǎng)基之外的額外營養(yǎng)物質(zhì)。為了優(yōu)化存活和生長，需要針對每種細胞類型選擇特定的培養(yǎng)基。例如，內(nèi)皮細胞對營養(yǎng)的需求與上皮細胞或神經(jīng)元有很大區(qū)別，因此需要特制的內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基。而傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基依靠血清提供生長因子、激素、脂質(zhì)和其他的未知組分，以支持細胞的生長。但對于原代細胞，高血清水平可導致細胞分化，或促進污染細胞如成纖維細胞的生長。
 

　　此外，添加血清也受到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培養(yǎng)基則可以避免這些問題，并且更加有利于促進特定類型細胞的生長。此外，其他一些實踐，例如在更多的生理學相關底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物，可以顯著的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。
 

　　實驗步驟：
 

　　1.試劑耗材準備；
 

　　2.取新鮮動物組織；
 

　　3.酶消化；
 

　　4.過濾網(wǎng)篩選、分離細胞；
 

　　5.加培養(yǎng)液，37℃、5%CO2培養(yǎng)；
 

　　6.傳代；
 

　　7.凍存；
 

　　8.復蘇。
 

　　應用：
 

　　1.為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；
 

　　2.為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；
 

　　3.服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。