實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒是對緩沖液系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化使反轉(zhuǎn)錄酶和聚合酶同時(shí)發(fā)揮大功效，具有方便、快速、靈敏度高、重復(fù)性好等特點(diǎn)。該試劑盒能以動(dòng)物、植物和微生物的總RNA或mRNA為模板，cDNA合成和PCR反應(yīng)在一個(gè)管中進(jìn)行，逆轉(zhuǎn)錄結(jié)束后可直接進(jìn)行PCR循環(huán)而不用增加額外的步驟；同時(shí)可對低至1fg的總RNA進(jìn)行擴(kuò)增，有助于大量樣品的處理并減少污染。
在實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒中一般有3次加樣步驟，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并注意不行濺出，不行產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
對于我們購買回來的實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒儲(chǔ)存及有效期，相信大家都是根據(jù)盒子上的日期決定它的有效期的，但是如果我們實(shí)驗(yàn)開封過的試劑盒，怎么確定它有多久的有效期呢？這點(diǎn)可能很多人不知道該如何保存。不用擔(dān)心，我司為您詳細(xì)解析關(guān)于實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒的儲(chǔ)存于有效期多久。
根據(jù)我司規(guī)定未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
在使用后的實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。
溫馨提示：實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
在實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)室，對試劑準(zhǔn)備一般不太注意，通常的做法是，在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題，其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。
